DIN 10106:2017 – Mikrobiologische Untersuchung von Fleisch und Fleischerzeugnissen – Bestimmung von Enterococcus faecalis und Enterococcus faecium – Spatelverfahren (Referenzverfahren)

DIN 10106:2017 – Mikrobiologische Untersuchung von Fleisch und Fleischerzeugnissen – Bestimmung von Enterococcus faecalis und Enterococcus faecium – Spatelverfahren (Referenzverfahren)
1 Anwendungsbereich
Diese Norm legt ein Referenzverfahren zur Bestimmung der Anzahl von Enterococcus faecalis und Enterococcus faecium fest. Das Verfahren ist anwendbar bei Fleisch und Fleischerzeugnissen sowie Erzeugnissen mit einem Zusatz von Fleisch und Fleischerzeugnissen.
2 Normative Verweisungen
Die folgenden Dokumente, die in diesem Dokument teilweise oder als Ganzes zitiert werden, sind für die Anwendung dieses Dokuments erforderlich. Bei datierten Verweisungen gilt nur die in Bezug genommene Ausgabe. Bei undatierten Verweisungen gilt die letzte Ausgabe des in Bezug genommenen Dokuments (einschließlich aller Änderungen).
DIN EN ISO 6887-1, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln — Vorbereitung von Untersuchungsproben und Herstellung von Erstverdünnungen und von Dezimalverdünnungen für mikrobiologische Untersuchungen — Teil 1: Allgemeine Regeln für die Herstellung von Erstverdünnungen und Dezimalverdünnungen
DIN EN ISO 6887-2, Mikrobiologie von Lebensmitteln und Futtermitteln — Vorbereitung von Untersuchungsproben und Herstellung von Erstverdünnungen und von Dezimalverdünnungen für mikrobiologische Untersuchungen — Teil 2: Spezifische Regeln für die Vorbereitung von Fleisch und Fleischerzeugnissen
DIN EN ISO 11133, Mikrobiologie von Lebensmitteln, Futtermitteln und Wasser — Vorbereitung, Herstellung, Lagerung und Leistungsprüfung von Nährmedien
3 Begriffe
Für die Anwendung dieses Dokuments gelten die folgenden Begriffe.
3.1
Enterococcus faecalis
Enterococcus faecium
grampositive Kokken, die nach dem in dieser Norm festgelegten Verfahren auf dem CATC-Nährboden kräftig oder weniger kräftig rote Kolonien bilden und im Katalase-Test negativ reagieren Anmerkung 1 zum Begriff: Die kräftige oder weniger kräftige rote Färbung der Kolonien entsteht durch die ganze oder teilweise Reduktion von Triphenyltetrazoliumchlorid (TTC).
Anmerkung 2 zum Begriff: Der CATC-Nährboden ist voll inhibitiv gegenüber Stämmen, die nicht zu den Streptokokken gehören, zudem weitgehend selektiv für Enterococcus faecalis und Enterococcus faecium. Andere Streptokokken mit schwacher oder ohne TTC-Reduktion können in niedrigen Anwachsraten zur Entwicklung kommen.
Diese sind koloniemorphologisch gut von den Enterokokken abgrenzbar, siehe Literaturhinweis [3].
4 Kurzbeschreibung
Agarplatten mit dem selektiven Nährboden werden mit Teilmengen von jeweils 0,1 ml der unverdünnten homogenisierten Probe oder der Erstverdünnung und der weiteren Verdünnungen jeweils im Doppelansatz beimpft.
Bei einer Temperatur von 37 °C wird unter aeroben Bedingungen 24 h bebrütet und anschließend 24 h bei Raumtemperatur nachinkubiert. Aus dem Anteil der auf dem Nährboden ganz oder teilweise rot gewachsenen Kolonien wird die Anzahl von Enterococcus faecalis und Enterococcus faecium je g oder ml der Probe berechnet.
5 Chemikalien und Nährboden Die Nährbodenbestandteile und Chemikalien müssen für mikrobiologische Zwecke geeignet sein. Um vergleichbare Ergebnisse zu erhalten, sind eindeutig deklarierte Nährbodenbestandteile und analysenreine Chemikalien oder Trockennährböden zu verwenden. Den Anweisungen des Herstellers ist strikt zu folgen. Das verwendete Wasser muss entweder in Glasgeräten destilliert oder entmineralisiert und mindestens von entsprechender Reinheit sein. Es darf keine Bestandteile enthalten, die das Wachstum von Mikroorganismen beeinflussen.